IVD原料之二抗篇：HRP標記親和純化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗

發布者：艾美捷科技發布時間：2022-09-02

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二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體，上面通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以應用廣泛，如ELISA、化學發光，免疫組織化學，免疫細胞化學，流式細胞術等。二抗是體外診斷試劑開發和生產過程中的總要原料之一，合理、靈活地選擇和使用二抗有助于節約產品研發周期、提高產品靈敏度。

上一期中小編帶大家了解了辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗兔IgG（H+L）二抗（111-035-003），今天小艾（艾美捷科技）帶大家一起來看一下Jackson ImmunoResearch品牌另一個IVD原料中的二抗“寵兒”：辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗（115-035-003）。

辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗

115-035-003產品信息一覽表：

115-035-003	產品信息一覽表
英文名稱	Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L)
中文名稱	辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗
靶標	小鼠
宿主	山羊
抗體形式	全IgG
特異性	IgG（H + L）
偶聯標記物	辣根過氧化物酶（HRP）
產品類別	完整IgG親和純化的抗體
克隆性	多克隆
產品狀態	凍干粉（具體以所購批次的說明書為準）
保存和溶解	原裝凍干粉儲存在2-8°C。用產品說明書指定體積的dH₂O復水，如果不清晰，則離心。在使用當天準備工作稀釋液。未稀釋液體產品在2-8°C下可穩定保存6周。（具體以所購批次的說明書為準）
溶解后保存方法	方法一：分裝并冷凍于-70°C或更低的溫度，避免反復凍融。方法二：添加等體積的甘油（ACS級或更高），使最終濃度減半，并以液體形式存儲于-20°C。有效期為自溶解日起一年。如果測試結果對預期用途是可接受的，有效期可以延長。
純化方法	使用與瓊脂糖珠偶聯的抗原通過免疫親和色譜法從抗血清中純化抗體。
緩沖液成分	0.01M磷酸鈉，0.25M NaCl，pH 7.6（具體以所購批次的說明書為準）
穩定劑	15 mg/ml牛血清白蛋白（不含IgG，不含蛋白酶）（具體以所購批次的說明書為準）
防腐劑	無（注意：使用疊氮化鈉作為防腐劑將抑制辣根過氧化物酶的酶活性）
建議的工作濃度或稀釋范圍	1:500 - 1:5000用于免疫組化/免疫細胞化學 1:5000 - 1:100000用于顯色法的ELISA和WB（顯色底物） 1:10000 - 1:200000用于使用ECL底物的WB

辣根過氧化物酶（HRP）偶聯物來源于辣根植物（Armoracia Rustana）的根，是通過改良的Nakane和Kawaoi方法（J. Histochem. Cytochem. 1974. 22, 1084）制備。過氧化物酶偶聯物通常用于免疫組織化學，蛋白質印跡和ELISA。親和純化的抗HRP酶及其偶聯物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于含HRP試劑的信號放大。對于哺乳動物細胞的免疫染色，使用抗HRP酶的優點是減少了背景，因為該抗體不能識別在那些細胞中發現的內源性過氧化物酶樣酶。

辣根過氧化物酶

當與適當的底物結合使用時，結合了報告酶的二抗可用于顯色和化學發光檢測方法。酶結合物可以應用于許多免疫技術，以提供強大而靈敏的檢測。辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶可與二抗，鏈霉親和素和純化的蛋白偶聯。

小艾貼心Tips：

1.注意內源性過氧化物酶。一些組織包含可與過氧化物酶底物反應的內源性過氧化物酶樣酶，導致背景染色?？捎眠^氧化氫預處理樣品來耗盡內源酶的活性，從而可以清楚地檢測到特定信號。

2.不要在含有HRP的溶液中加入疊氮化鈉。它將使酶失活。

3.如果添加甘油以延長溶解后產品的保質期，請確認甘油為ACS級或更高級。因為較低等級的甘油可能會嚴重抑制過氧化物酶的活性。

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