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超500篇文獻驗證,Nature&PNAS都在用sGAG檢測試劑盒

發布者:艾美捷科技    發布時間:2022-05-24     
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硫酸氨基葡萄糖是天然的氨基單糖,是人體關節軟骨基質中合成蛋白聚糖所必需的重要成分。氨基單糖可刺激軟骨細胞產生具有正常多聚體結構的糖蛋白,抑制某些可損害關節軟骨的酶(如膠原酶和磷脂酶A2),抑制損傷細胞的超氧化物自由基的產生,防止皮質激素及某些非甾體類抗炎藥對軟骨細胞的損害,減少損傷細胞的內毒素因子的釋放。因此在研究過程中對于硫酸氨基葡萄糖的定量檢測對于某些疾病的診斷尤為重要。

 

今天艾美捷給大家帶來一款Biocolor公司的專利產品用于檢測樣本中的硫酸氨基聚糖,這款試劑盒采用常規生化方法,通過標準曲線和比色,可定量分析總硫酸化多糖(氨基聚糖和蛋白聚糖)的含量,亦可測定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料,它可以特異性的與氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖組分結合,該方法不適于檢測已經降解的硫酸化雙糖片段。


biocolor硫酸氨基聚糖


sGAG檢測試劑盒可檢測廣泛的蛋白多糖,可檢測的氨基多糖包括硫酸軟骨素、硫酸角質素、硫酸皮膚素、硫酸肝素,不適合檢測包含海藻酸的樣品,因為它們含有糖醛酸。該試劑盒也不能對透明質酸定量,但透明質酸并不會對硫酸化氨基多糖的檢測產生干擾。細胞培養基中20%的胎牛血清也不會干擾實驗。該方法檢測靈敏度為5ug,所需時間為1小時。

 

檢測樣本:可來自軟骨組織、動脈組織、肺組織、皮膚組織、腫瘤組織、細胞核組織提取物、細胞培養液、羊水和尿液

 

Blyscan檢測流程圖


Blyscan檢測流程圖


sGAG檢測試劑盒實驗步驟 

1. 繪制標準曲線

2. 待測樣品的處理:

取50ul待測樣品進行實驗。如果反應物在656nm初的吸收峰大于1.5,則對樣品進行稀釋,待測樣樣品濃度落入標準曲線中段時,準確度較高。

3. 硫酸氨基聚糖—染料復合物的獲得

加1.0ml的Blyscan染料溶液到待測樣本中,充分混勻,待不溶物出現,離心,棄上清,則獲得紫色的硫酸氨基聚糖—染料復合物

4. 硫酸氨基聚糖—染料復合物中染料的釋放

加入1.0ml的染料釋放劑,充分混勻。溶解5min以上,使染料充分釋放

5. 測定

用分光光度計于波長656nm處測定,或使用colorimeter紅色濾光片測定

 

sGAG檢測試劑盒檢測結果展示:


sGAG檢測試劑盒檢測結果

(a)0和5ug sGAG和Blyscan Dye,(混合15分鐘后);
(b)混合30分鐘,然后離心(注意sGAG-Dye顆粒);
(c)從管中抽出非sGAG染料,并保留顆粒;
(d)使用Dye Dissociation Reagent從sGAG中釋放的染料。

 

產品推薦:

貨號名稱規格
B1000Blyscan? sGAG Assay (Standard Kit Size)110 assays
B3000Blyscan? sGAG Assay (Large Economy Size)440 assays

僅供科研使用,不得用于醫療.

 

sGAG檢測試劑盒已發表文章,超500篇,僅摘錄展示部分:

 

Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.com.

Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.

 

Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794

 

Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.

 

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